što je HPLC

Što je HPLC?

Tekućinska kromatografija je u osnovi vrlo poboljšani oblik kromatografijom. Umjesto otapala što

dozvoljeno za kapanje kroz stupac pod gravitacija, prisiljena je kroz pod visokim tlakovima do 400 atmosfere. To ga čini

mnogo brže.


To također omogućuje korištenje puno manje čestica veličine stupca materijal koji daje puno veću površinu za pakovanje

za interakcije između Stacionarna faza a molekule teče dalje. To omogućava bolje odvajanje od u

komponente smjese.


Drugi veliki napredak nad kromatografijom tiče metode otkrivanja što može biti korišten. Ove metode

su visoko automatizirano i vrlo osjetljiva.



Stupcu i otapalo


Zbunjujuće, postoje dvije varijante u upotrebi u HPLC Ovisno o Relativnom polarnosti otapala i Stacionarna faza.


Normalna faza HPLC


Ovo je u suštini isto kao što će već imati čitanje o u tankoslojnom kromatografijom ili kromatografijom.

Iako je opisana kao andquot; normalandquot; to isnand #39; t preko obično iskorišten oblik HPLC.


Stupac ispunjen male silika čestice, a otapalo je nepolarnih - heksan, na primjer. Tipična stupac sadrži vanjsku

promjera 4,6 mm (a može biti manje od toga), a dužine od 150 do 250 mm.


Polarne spojeve u smjesu kroz stupac će se držati više polarnih silika od nepolarnih tvari

neće. Nepolarnih one će Stoga brže prođe kroz stupac.


Obrnuti fazu HPLC


U ovom slučaju, veličinu stupaca je isti, ali silicij je Modificiran da bi nepolarnih prilaganjem dugo ugljikovodičnih lanaca za svoje

površina - obično s 8 ili 18 ugljikovih atoma u njima. Polarna otapala koristi - na primjer, mješavinu vode i na

alkohol kao što su metanol.


U tom slučaju će biti jaka privlačnost između polarnih otapala i polarnih molekula u smjesu kroz

stupcu. Tamo pobijedilaa #39; t biti toliko privlacnost izmedju ugljikovodičnih lanaca priljubljen kremena (Stacionarna faza) i u

polarnih molekula u otopini. Polarne molekule u smjesi Stoga će provesti većinu svog vremena kreće s otapalom.


Sobe polarnih spojeva u smjesi će teže obrazac atrakcije s ugljikovodičnih skupina zbog van der Waals

disperzija snaga. Oni će također biti manje topive u otapalu zbog potrebe razbiti vodikovih veza kao što su stisnuti u

između vode ili metanol molekula, na primjer. Stoga oni provode manje vremena u rješenju u otapalu i ovo će usporiti

ih na svom putu kroz stupac.


To znači da sada je polarne molekule koje će putovati brže kroz stupac.